酵母互补实验的快速检测方法

 酵母，一种体内模式生物，具有很大的优势。酿酒酵母，芽殖酵母，是一种单细胞真核生物。大多数进程，例如转录，翻译，蛋白质折叠都是保守的，因此酵母是一种非常合适的复杂哺乳动物细胞的替代品。

与其他模式生物不同，例如大肠杆菌，酵母没有毒性，而且能表达完整的膜蛋白。

1996年对酵母基因组进行测序后，出现了许多用于基因操作的工具。发明了例如穿梭载体，通过同源重组删除基因。可以使用具有缺失菌株的大型文库，轻松设置功能分析。

酵母互补试验，缺失某种蛋白质的酵母突变体，通过转基因将一个外显子基因质粒转入突变体。此时，这株酵母突变体面对一种境况，就是这种缺失掉的蛋白质功能会影响它的存活和生长。如果这种缺失型突变体生长出来了，就意味着这种转入的外显子基因补偿了这种缺失基因的功能，使得酵母细胞能够正常存活和生长。有一些方法可以检测酵母的互补试验，比如液体测量，尿素测量法，氨测量法，水份测量法等。在此，我们介绍一种方法：计数酵母的方法。

CellDrop 明场计数酵母细胞：采用*的小细胞模式，结合AI算法，准确计算酵母细胞总数。

不仅如此，采用荧光染料FDA+PI的组合，可以进行酵母细胞的活力检测

 活性检测：

     活性检测即用两种不同的荧光试剂进行染色。Y20.1细胞，过夜诱导，在明场计数仪下计数5e6 cells/ml. 针对CellDrop 酵母活性分析（DeNovix）18ul的细胞悬浮液和1ul的FDA和PI。混合物避光下15min。10ul的混合物侧面peptide入到celldrop中，进入yeast app进行测量。

   活力检测中，应用荧光试剂判断酵母细胞的死活，将检测时间从5天的尿素检测或氨检测时间缩短到了十几秒。

    无需一次性或可重复利用的计数板，CellDrop BF/FL做到绝对的无耗材，是新一代计数仪的代表。