微量热泳动（MST）分子相互作用分析仪

德国 NanoTemper 公司于2010年推出的Monolith系列微量热泳动仪，提供了一种简捷、快速分析生物分子相互作用的方法。Monolith系列微量热泳动仪，可在溶液中测定生物分子间相互作用，小到离子，大到病毒颗粒，10分钟即可获得亲和力数据。已有600家高校、科研机构和企业使用Monolith系列微量热泳动仪进行生物分子相互作用研究，发表文献超过2000篇。

微量热泳动（MST）分子相互作用分析仪​：

1. 迅速获得试验结果：10 分钟之内完成亲和力测定；
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3. 适用于所有类型样品：不受样品大小和分子量限制；

4. 样品准备简单：溶液中直接测定，无需表面固定；

5. 样品用量极少：测定Kd值仅需要数ng样品；

6. 无需蛋白纯化：荧光融合蛋白可无需纯化，直接在裂解液中进行试验；

7. 试验优化方便：数据直接体现样品性质；

微量热泳动（MST）分子相互作用分析仪​  Monolith NT.115主要参数：

1. 可测定样品类型：离子、化合物、核酸、多肽、蛋白、糖类、脂质体、纳米颗粒、病毒等；
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3. 测定亲和力（KD值）范围：1 pM – mM；
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5. 测定样品的分子量范围：10¹ - 10⁷ Da；
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7. 获得亲和力所需要的蛋白样品量小于0.5 μg；
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9. 一次可测定的样品数量：16个；
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11. 每个样品所需体积：4 μL；
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13. 获得亲和力所需要的测定时间：10 min；
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15. 对测定缓冲液没有限制，包括但不限于含去垢剂的缓冲液、含DMSO（0-100%）等有机溶剂的缓冲液、细胞裂解液、上清液、血清、血浆、组织匀浆等。
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17. 除测定亲和力外，还可测定化学计量数，即生物分子结合位点的数目；热力学参数：ΔG (自由能 )、ΔH (焓)、ΔS (熵)；进行竞争性试验，获得Ki；区分多次结合，分别计算多个结合位点的亲和力；测定蛋白寡聚化的亲和力和动力学；
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19. 仪器无需预热可直接开机使用，实验完成后不需要对仪器进行清洗维护；
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检测原理：

微量热泳动（MST） 是一种定量分析生物分子间相互作用的有效方法。它检测分子在微观温度梯度场中的运动，探测其水化层、电荷以及分子大小的变化。MST将荧光检测与热泳动的灵活性及灵敏度结合起来，快速、可信地检测分子间相互作用。MST 测试时，由红外激光建立微观温度梯度场，通过荧光染料标记、荧光融合蛋白、色氨酸自发荧光等信号追踪，分子在微观温度梯度场中的定向移动就可以被探测和量化。

参考文献：

Cell : "M*lent Small-Molecule Pan-RAS Inhibitors." Matthew E. W., et al.  Cell, 2017, 168, 878-889

Science : "Precursor processing for plant peptide hormone maturation by subtilisin-like serine proteinases." Katharina S., et al. Science 2016, 354, 1594-1597

Science : "Competition between MPS1 and microtubules at kinetochores regulates spindle checkpoint signaling." Yoshitaka H., et al. Science 2015, 348, 1264-1267

Nature : “Molecular basis of nitrate uptake by the plant nitrate transporter NRT1.1.”Parker and Newstead, Nature, 2014, 507, 68-72