电转仪celetrix

电转仪celetrix

细胞电转染（电转），也叫细胞电穿孔(electroporation), 是把外源大分子物质DNA、 RNA、 siRNA、 蛋白质以及一些小分子等导入细胞膜内部的重要方法。

在瞬间强大电场的作用下，溶液中细胞的细胞膜具有了一定的通透性，带电的外源物质以类似电泳的方式进入细胞膜。 由于细胞膜磷脂双分子层的电阻很大，细胞外部电流场产生的细胞两极电压都被细胞膜承受，细胞质内分到的电压可以忽略不计，细胞质内部几乎没有电流，因此也决定了正常范围内的电转过程中细胞毒性很小。 电场使DNA等物质进入细胞膜后只能停止在细胞膜附近，随后细胞本身的机制可以允许这些物质到细胞核等处。

普通电转能量过高可导致部分细胞因膜破坏而死亡，其中能存活下来的细胞内部都不会受到电流影响，因为细胞膜完整是细胞存活的必要条件。

由千电转技术依靠的是物理方法，细胞表面的分子特性对电转影响比较小。 相比化学转染方法和病毒载体转染方法，电转可以用在所有的细 胞种类上，而且容易定量控制。

以及相关的电击管与电转液综合优化了仪器电学特性、 电击管内的电场均匀度以及电转液的细胞保护作用，是获得高效、 低毒性细胞电转的解决方案。

celetrix电转仪应用：

•     有效的细胞：几乎所有的真核细胞，包括所有细胞系，原代细胞，干细胞，血液和免疫类细胞，神经细胞，植物细胞和胚胎。

•     可以电转的物质包括DNA、 RNA、 siRNA、 蛋白质等。

•     适用实验：瞬时或稳定表达蛋白质、 基因敲除与敲入、 siRNA和其他分子机制研究。

•     科研领域：细胞分子生物学、 免疫学、 血液学、 神经学、 癌症研究、 新药开发等。

功能强大   操作简单

效率高       细胞死亡率低

适用所有真核细胞；可以电转DNA、RNA、siRNA、蛋白质等；
外观美观、界面简洁、操作简单。
电脉冲参数设定方便，内部电路反应迅速，设定完成即可启动，瞬间完成电转。
示波器功能，显示实际通过样品的电流波形，可视化掌控实验质量。
LED照明灯，清楚指示电击管连接状态。
功率强大，单次高效电转可达1000ul，可以经济快速的电转大量细胞。

全部过程只需5步
1、悬浮细胞（贴壁细胞先消化成单细胞状态）1000rpm离心3min。
2、无血清细胞培养液洗一遍、1000rpm离心1min。
3、重悬细胞在电转液中，加入DNA，将细胞转移至电击管盖好并放入仪器中。
4、设定参数进行电击，大部分细胞系可以使用30ms单脉冲，只需改变一个电压参数。
5、取出细胞进行培养。

技术参数

celetrix电转仪应用的优势：

Celetrix新一代电转可以高效转染从新鲜PBMC到刺激培养阶段的T细胞。 与其他电转技术相比， Celetrix电转技术具有效率。

我们的技术也具有细胞存活率，并且细胞在电转后能够和未电转细胞

Celetrix电转仪使得CAR-T, TCR-T制备、 CRISPR介导的基因编辑等变得容易。

目前70%以上的治疗性抗体蛋白都是由CHO细胞产生

的，Celetrix电转技术对CHO细胞可以达到高效稳定

(90%以上）的电转效率和80%以上的存活率， 为治疗 性抗体细胞转染领域提供了更加高效、便捷、 稳定的转 染方法。

利用Celetrix的电转技术电转Cas9蛋白和gRNA (+)或者Cas9蛋白，通过T7El核酸内切酶检测基因编辑效率，在APP, AAVSl, OCT4和PDCDl四个基因位点的编辑效率均超过50%, 其中AAVSl基因位点编辑效率能够达到70%。

•     电极杯中样品与电极接触面积大，电化学反应产生毒性物质多，并且产生非常多的气泡。 气泡对电转的实际影响非常大。

•     由千气泡是绝缘体，电流只能从气泡之间的间隙溶液流过，这样导致气泡间隙的溶液中电流富集升高，处千其中的细胞因承受太高的电压而死亡。

电极杯内的溶液上方受到液面效应影响，电场不均匀。 靠近两个电极1-2mm的区域由千气泡的作用，电场也不均匀。电极杯内电场比较均匀的较优电转区域很小（右图蓝色部分），而1mm或者

2mm的电极杯甚至可能没有较优电转 区域。

液体样品密封呈规整圆柱形，没有液面效应影响电场均匀度。

电极与液体接触面积小，气泡少又而且被压缩，不影响电流分配。

电击管内部电场均匀，全部都是有效电转 区域。